尼莫地平在大鼠体内的药物代谢动力学研究(2)

栏目分类：临床药学   发布日期：2009-12-06   浏览次数：次

    2.3  线性关系考察 取离心管数支，精密加入不同量的尼莫地平对照品溶液，以空白血浆配成浓度为10、20、60、160、400、800、1600、3200ng·ml-1的标准血浆,按“大鼠血浆中药物浓度测定”项下操作,每种浓度2份,记录峰面积，以尼莫地平峰面积对浓度进行加权回归分析。结果表明尼莫地平在10～3200ng·ml-1范围内线性良好，10mg·kg-1剂量的随行标准曲线回归方程为：A=591C+415,r=0.9998；20mg·kg-1剂量的随行标准曲线回归方程为： A=606C+264,r=0.9997；40mg·kg-1剂量的随行标准曲线回归方程为：A=608C+809,r=0.8887。

    2.4  提取回收率与方法回收率测定 取离心管数支，精密加入尼莫地平不同量吹干溶剂，使含尼莫地平绝对量为60、400、3200ng,加甲醇150L溶解残渣进样分析，得峰面积As。另取空白血浆配成含尼莫地平 60ng、400ng、3200ng·ml-1的标准血浆，按“大鼠血浆中尼莫地平浓度测定”项下操作，每种浓度５份，得血样峰面积Ax，血样提取物峰响应值与甲醇配制的相同浓度的尼莫地平直接进样峰面积比值(4.5Ax/4As×100%)即为提取回收率，将测得的峰面积代入标准曲线得到的浓度除以加入的浓度即为方法回收率。

    2.5  精密度试验 按“线性关系考察”项下操作，配制浓度分别为60、400、3200ng·ml-1的尼莫地平标准血浆进行分析，在同日内用同一条标准曲线及同一台仪器进行分析，测定日内精密度；于试验第１、２、３、４、５天，分别测定其日间精密度，计算日内相对标准差(RSD)和日间相对标准差(RSD)。

    2.6  灵敏测定 逐级降低加入血浆中尼莫地平量，测得尼莫地平在大鼠血浆中的最小检测限I为５ng·ml-1。

    3  大鼠血药浓度

    测定大鼠ig三个剂量后血浆中不同血药浓度，血药浓度时间曲线见图２。将血药浓度一时间数据分别采用3P97程序（中国药理学会数学药理委员会编制）[1]按一级吸收的开放一室模型，一级吸收的开放二室模型，进行模型拟合，判别指标为1.Re=∑（Ci-Ci*）2；2.AIC=NlnRe+2m经模型拟合,根据最小AIC准则,选择二室模型为好。

    4  讨论

    4.1  大鼠血药浓度方法建立时，发现在最大波长231nm检测，有来自溶剂中的较小的干扰，选择240nm测定，干扰消失，虽灵敏度有所降低，但方法的灵敏度符合药代动力学要求，故最终240nm作为设定波长。

    4.2  尼莫地平样品处理 直接沉淀法：分别以甲醇和乙腈做蛋白沉淀剂，提取回收率均在90%以上，但动物预试验未能测出血药浓度，表明本品血药浓度低，样品需采用液—液提取浓缩的方法处理。

    4.3  有机溶剂在药物水溶液中的提取回收率 结果表明：提取前应先用2mol·L-1碳酸钠溶液碱化，碱化后的回收率大于80%。

    4.4  沉淀试剂的选择 根据提取液挥发的难易及空白干扰情况，沉淀蛋白可使药物释放出来，选择甲醇沉淀，环乙烷提取，提取液离心易分层，两者对组织匀浆和粪便匀浆提取率均高且相当，由于内标在此提取条件下回收率不稳定，测定方法选用外标法。

【参考文献】
  　　 [1] 卫生部药品审评办公室，药物制剂人体生物利用度试验指导原则[S]．中国临床药理学杂志，1992，8（3）：189～190．